核酸一级结构的测定

快速、准确地测定出一种核酸分子的一级结构具有十分重要的意义。比如在医学上，不仅可以帮助医务工作者迅速确定出流行病爆发或遭遇生物恐怖袭击时的病原体，以拯救许多宝贵的生命、而且还可以帮助医生诊断出与遗传性疾病有关的基因，从而找到合适、有效的治疗方法。

在1975年之前，确定核酸的一级结构要比测定蛋白质的一级结构困难得多，其主要原因是核酸只含有4种核苷酸，而蛋白质却有20多种氨基酸，显然，能够对核酸进行选择性切割的特异性位点很少，于是识别特定的核苷酸序列就很困难，不确定性很大。

同时，大多数核酸所含的核苷酸数目要比多肽链上的氨基酸数目多得多，这就进一步增加了测序的难度。使核酸序列测定发生革命性变化的因素主要有两个：

其一是发现了能够识别特定核苷酸序列并对DNA进行特异性切割的限制性内切酶（RE），利用RE的这种性质，可以将一个长的核酸分子定向切割成若干可操作的片段：

其二是聚丙烯酰胺凝胶电泳技术的发展，使人们能够将大小仅差1个核苷酸的核酸片段分开。