蛋白质的高级分析

蛋白质三维结构的确定

测定蛋白质三维结构的方法有X射线晶体衍射、核磁共振波谱法和冷冻电镜，此外，还可以使用同源建模进行预测。

蛋白质功能的研究

研究一种蛋白质的功能，除了可以结合它的三维结构对其直接进行研究以外，还可以通过观察和分析破坏目标蛋白质基因或抑制目标蛋白质基因的表达而造成的表型变化来研究，有时还可以利用生物信息学的方法对它的功能进行预测。

如果是从编码蛋白质的基因开始研究的话，有基因敲除、基因敲减和显性负性突变。

多肽的固相合成

多肽的固相合成由美国科学家Bruce Merrifield于1963年创立。其基本原理是：

根据事先设计好的多肽序列，先将所要合成肽链的C端氨基酸的羧基以共价键固定到一个不溶性的高分子树脂上；

然后从C端向N端，重复

““

去保护（除去前一个已与固相树脂相连的氨基酸α-氨基上的保护基团）

→活化（激活下一个待连的氨基酸的羧基）

→偶联（让去保护的氨基和活化的羧基之间缩合，形成肽键）

→洗脱和过滤（去除没有反应完的各种试剂）

””

这几步反应，直至达到所要合成的肽链长度。

然后再除去侧链上的保护基团，最后将肽链从树脂上裂解下来，经过纯化等处理，即可得到所要的多肽。

固相法最大的进步主要解决了分离、纯化方面的难题。每步反应后只需简单地洗涤树脂，便可达到纯化目的，这克服了经典液相合成法中的每一步产物都需纯化的麻烦，为自动化合成肽链奠定了基础。

Merrifield也因建立固相法获得了1984年诺贝尔化学奖。